Система комплемента относится к факторам, играющим значительную роль в иммунном ответе, вос-палении и развитии многих патофизиологических процессов. Нормальная функциональная активность сис-темы комплемента осуществляется по средствам образования большого количества биологически активных молекул и мембраноатакующего комплекса, способствующих обсонизации и эффективному уничтожению микроорганизмов, удалению иммунных комплексов, индукции и усилению иммунного ответа[4]. К развитию патологических состояний, воспалительных, аутоиммунных, нейродегенеративных и инфекционных заболеваний может приводить как недостаточная, так и избыточная активность системы комплемента[2].
Поиск и разработка методов влияния на систему комплемента представляет собой важное направле-ние, которое обладает терапевтическим потенциалом. Поэтому скрининг воздействий, приводящих к изме-нению состояния системы комплемента, составляет предмет исследования многих научных групп [1,3,5].
Целью работы являлось изучение модуляции активности классического и альтернативного пути сис-темы комплемента, под влиянием лазерного излучения в условиях in vitro.
Для изучения модулирующего действия лазерного излучения на активность системы комплемента использовалась сыворотка крови клинически здоровых доноров. Исследуемые образцы разделялись на 2 порции. Одна порция – интактная – использовалась для определения активности классического и альтерна-тивного путей активации системы комплемента и в дальнейшем являлась контролем. Другая порция 1200 мкл, подвергалась воздействию лазерного излучения при помощи аппарата квантовой терапии Витязь, с рекомендованными параметрами для терапевтического воздействия: длина волны 620 – 700 нм, непрерывное излучение, частота 3000 Гц, энергия воздействия на точку 1,2 Дж, 2 минуты.
В силу особенностей организации системы комплемента регистрация эффектов полученных после лазерного облучения требует особого подхода при анализе полученных результатов экспериментов. После облучения в образцах сыворотки крови определялась активность классического и альтернативного путей активации системы комплемента в двух точках кинетического мониторинга – после 20 и 30 минут инкуба-ции с гемолитической системой. Результаты сравнивались с показателями активности в интактном образце сыворотки крови.
Анализ активности классического пути системы комплемента в первой точке кинетического монито-ринга показал статистически значимое снижение, по сравнению с контролем (р=0,005). Снижение значений регистрировалось во всех образцах сыворотки крови, но в разной степени: от 4% до 24%.
При этом изменения охватывали преимущественно те образцы сыворотки, которые характеризова-лись высокими значениями, что подтверждается проведением корреляционного анализа. Коэффициент кор-реляции, отображающий зависимость изменений активности классического пути комплемента, под действи-ем лазерного луча, в сравнении с контрольными образцами сыворотки крови, составил 0,96.
Высокие значения активности классического пути активации означают присутствие в крови большой численности молекул компонентов комплемента. При попадании во внутреннюю среду организма чужеродного агента, происходит инициация активации системы комплемента по классическому пути, и сопровож-даться образованием большого количества субкомпонентов обладающих активностью анафилотоксинов: С5а и С3а.
Эти субкомпоненты обладают выраженной биологической активностью, физиологическая роль кото-рых состоит в привлечении клеток воспалительного экссудата в очаг воспаления, а также в активации их эффекторных механизмов. Высокий уровень содержания субкомпонентов системы комплемента, во внут-ренней среде организма, учитывая их биологическую активность, может вызывать ряд патофизиологических реакций, осложняющих течение и прогноз заболеваний. В этой позиции применение лазерного воздействия выглядит весьма перспективным, поскольку в режиме, примененном в эксперименте способно ограничить активацию чрезмерного уровня, тем самым привести к снижению выраженности патофизиологических эффектов.
При анализе активности классического пути системы комплемента при инкубации с гемолитической системой 30 минут внимание привлек тот факт, что у 50% исследуемых образцов происходило снижение активности от 0,33% до 11,89% (р=0,043), а у второй половины увеличение от 045% до 3, 38% (р=0,043). Такой селективный эффект может обладать диагностической потенцией: если сыворотку крови, полученную в стандартных условиях от человека, подвергнуть лазерному воздействию с последующим определением активности КПК, то существенное увеличение или снижение показателя будет характерно не для всех лиц, а лишь для тех, кто обладает некими признаками.
Анализ альтернативного пути при инкубации с гемолитической системой 20 минут, показал наличие статистически значимых различий по сравнению с контрольными образцами (р=0,0093). В среднем актив-ность снизилась на 7%. Интерес привлекли 2 образца: в одном случае произошло резкое снижение на 20,93%, а во втором случае на 4% активность увеличилась.
При инкубации облученных образцов сыворотки 30 минут активность альтернативного пути актива-ции системы комплемента в 7 образцах активность снизилась в среднем на 3,38%, а в 3 образцах зарегист-рировано увеличение на 10%.
Таким образом, на данном этапе развития темы можно сделать вывод, что применение лазерного из-лучения с целью модификации активности системы комплемента возможно и выглядит весьма перспективно. Дальнейшее изучение должно быть направленно на выявление мишеней действия лазерного излучения, и механизмов развития селективного эффекта.
Литература
- Гринзайд, М. И. Иммуномодулирующие эффекты физических факторов: Пособие для врачей/ М.И. Гринзайд [и др.]. Пятигорск, 1996.
- Гриценко, О. Н. Роль генетических дефектов системы комплемента в развитии гемолитико-уремического синдрома/ О. Н. Гриценко // Молекулярная и прикладная генетика. 2008. Т. 7. С. 137–142.
- Кончугова, Т. В. Использование импульсного низкоэнергетического инфракрасного лазерного из-лучения как метода немедикаментозной иммунокорекции: автореф. дис. канд. биол. наук: 14.00.34 / Т. В. Кончугова. Москва, 1993. 22 с.
- Титов, Л. П. Система комплемента: структура и иммунобиологическая роль/ Л. П. Титов// Весцi Нацыянальнай акадэмii навук Беларусi. 2006. № 3. С. 95–110.
- Улащик, В.С. Иммуномодулирующее действие лечебных физических факторов/В. С. Улащик// Медицинские новости. 2006. № 11. С. 8–14.