Виды микроскопии:
- Светопольная микроскопия
- Темнопольная микроскопия
- Фазово-контрастная микроскопия
- Аноптральная микроскопия
- Люминесцентная микроскопия
- Электронная микроскопия
Светопольная микроскопия (световая микроскопия) – предназначена для изучения окрашенных препаратов. Световой биологический микроскоп состоит из механической части (основание или штатив, коробка с механизмом, предметный столик, тубусодержатель, бинокуляр, револьвер с объективами, включая макро- и микровинты) и оптической объектив из линз (8х, 20х, 40х, 90х), окуляр из линз (7х, 10х, 15х), осветительное устройство: зеркало (плоское для дневного рассеянного света и выпуклое для искусственного освещения) и конденсор с диафрагмой – собирает лучи в пучок).
Интересно:
- Иммерсионное масло имеет приблизительно ту же степень преломления, что и стекло (предметное).
- Объект увеличивает только объектив, а окуляр же увеличивает только изображение полученное в объективе.
- Общее увеличение микроскопа = произведение увеличения объектива на увеличение окуляра. Или же общее увеличение микроскопа может быть рассчитано по формуле: 160/Fобъектива х 250/Fокуляра,
- гдеF– Фокусное расстояние; 160 – длина тубуса (объективы дают наилучшее изображение); 250 – окуляры рассчитаны на эту величину, что соответствует расстоянию нормального невооруженного глаза от читаемого текста.
- Изображение в микроскопе получается обратное из-за линз объектива.
- Иммерсионный объектив надо протирать: либо спирт:вода=1:1 (но может сушить и царапать линзы), либо бензолом, толуолом (но расслаивает линзы).
- Механические части протирают бензином или ксилолом, а затем смазывают маслом.
Темнопольная микроскопия(темновая) – используется за наблюдением за движением бактерий и спирохет. Применяется боковое освещение – получается светящийся объект на тёмном фоне (бактерии – плотные частицы отражают боковой свет).
Интересно:
- Стёкла должны быть очень чистыми и определённой толщины (предметные – не более 1,2 мм, покровные – 0,17 мм).
- Готовят препараты по типу «раздавленная капля» или «висячая капля».
Фазово-контрастная микроскопия– используется для изучения нативных препаратов (бесцветные, прозрачные, детали, строение которых оптически мало различимо между собой).
Аноптральная микроскопия – используется для изучения морфологии и локализации нуклеотидов, для наблюдения за изменениями морфологии бактерий в процессе нормального роста и размножения.
Люминесцентная микроскопия – основано на том, что одни вещества под влиянием падающего света на них света испускают лучи с другой (обычно большей) длиной волны, при этом меняется и цвет. Ведётся в затемненном помещении. Различается первичная флуоресценция (вещества самого объекта способны флуоресцировать) и вторичная (специальная обработка объекта веществами, способными флуоресцировать – флуорохромы: акридин оранжевый, флуоресцеин, родамин). Люминесцентная микроскопия широко используется из-за её преимуществ:
- Цветное изображение
- Высокая степень контрастности самосветящихся объектов на чёрном фоне
- Возможность исследования прозрачных и непрозрачных объектов
- Возможность исследования разных жизненных процессов в динамике их развития
- Обнаружение и установление локализации отдельных микробов
- Развитие тонких методов цито- и гистохимии
- Экспресс-диагностика инфекций.