Фиксатор Карнуа
- спирт абсолютный (100º) – 6 частей, 60 мл
- ледяная уксусная кислота – 1 часть, 10 мл
- хлороформ – 3 части, 30 мл
Протекает быстро, долго оставлять в фиксаторе не следует (≈ 1 час). Обычно используются 6 кубов 100º спирта и 2 куба ледяной уксусной кисоты.
Проводка через спирты (после Карнуа)
Слить фиксатор, залить материал 96º спиртом (3-4 смены) до исчезновения запаха уксусной кислоты. Выдержать в этих спиртах 2-3 часа или более. Этот спирт в дальнейшем можно использовать для приготовления фиксатора или промывки после него. Перевести в абсолютный спирт – 2 раза на 1,5-2 часа.
Дальнейшая обработка универсальна: Смесь I — 1,5 часа.
Смесь II — 1,5 часа.
Смесь III — 1,5 часа.
Хлороформ I — 2 часа
Хлороформ II — 2 часа (можно на ночь). Поставить в термостат (40ºС). Через 1-2 часа на 60ºС. Оставить на несколько дней до удаления запаха хлороформа и на вкус (сладость) (до 10 дней).
Разновидность фиксатора Карнуа (в полевых условиях):
- спирт 96º – 6 мл
- уксусная кислота 100% – 1 мл
Фиксатор Мактворы
- спирт 70º – 90 мл – 18 мл – 9 мл
- формалин – 5 мл –1 мл – 0,5 мл
- уксусная кислота крепкая – 5 мл – 1 мл – 0,5 мл
Фиксатор спиртово-уксусный
- спирт 3 части
- уксусная кислота 1 часть
После фиксации, материал обрабатывается в течении 24 часов 3%-ным водным раствором Сr2O3 для легкго нарезания срезов на микротоме.
Фиксатор FAA
- спирт 70º – 100 мл
- 40% формалин (тот, что в продаже) – 7 мл
- ледяная уксусная кислота – 7 мл.
В этом фиксаторе материал выдерживается 3 суток, затем переводят в 70º спирт (≈ на 2 часа). В следующем 70º спирте материал хранится постоянно.
Фиксатор Серра (класический)
- спирт 96º – 3 части
- 40% формалин – 1 часть
Фиксатор Серра (по Никифорову)
- спирт 96º – 7 частей
- 40% формалин – 3 части
- уксусная кислота – 0,1 части
Фиксатор спирт-формалин
- спирт 70º – 100 мл, 40% формалин – 2 мл.
- 10 мл формалина на 100 мл спирта 70º.
- 4-10 мл 40% формалина на 100 мл 50º спирта.
Биоматериал в этом фиксаторе можно долго держать.
Фиксатор Левицкого (модификация Навашина)
І смесь: (до 3-х дней)
- CrO3 1% – 3 мл
- формалин 10% – мл (17мл/20 мл)
ІІ смесь: (до 7-ми дней)
- CrO3 1% – 15 мл
- Осмий 2% – 2 мл
- Вода дистиллированная – (18мл/35 мл)
Промывать сутки в проточной воде. После обезвоживания спиртами перед парафином проводить через ксилол.
Фиксатор ФУС (спирт-формалин-уксусная кислота)
- Ледяная уксусная кислота – 5 мл
- 40% формалин, тот что в продаже – 5 мл
- Спирт 50-70º – 90 мл
Фиксатор Бенсли
- 2% Осмиевая кислота – 2 мл
- 10% Двухромовокислая кислота – 2 мл
- Вода дистиллированная – 6 мл
- Уксусная кислота – 1 капля
Держать 24 часа, промыть как обычно. До окраски требуется окраска перекисью водорода.
Фиксатор Левитского
Из всех фиксирующих веществ (включая и жидкость) наилучшие результаты получены:
Смесь І: (2-3 дня)
- 10% формалин – 9 частей
- 1% хромовая кислота – 1 часть
Смесь ІІ: (7 дней)
- 1% хромовая кислота – 15 частей
- 2% осмиевая кислота – 4 части
Дальнейшая обработка и окраска железным гематоксилином обычная. Толщина срезов 2 µ.
Фиксатор Ньюкамера
- 6 частей – пропилового спирта
- 3 части – пропионовой кислоты
- 1 часть – ацетона
- 1 часть петролейного эфира
- 1 часть диокана
Фиксатор для морфологических целей. Хранить 1 сутки, заменить новой порцией и можно оставить в фиксаторе на любой срок.
Фиксатор Craf III
- 0,3% хромовая кислота
- 2% уксусная кислота
- 10% формалин
Обработка материала – предфиксационным раствором 8-гидрооксихинолина (0,002 мол. водного раствора)
Приготовление: 0,058 гидрооксихинолина растворяется в 200 мл тёплой дистиллированной воды.
- Обработка производится при температуре проточной воды (10-15ºС) в течение 3-4 часов.
- Промывка в воде в течение 5 минут.
- Фиксация по Карнуа в течение 24 часов.
- Промывка и проводка для постоянных препаратов. Промывка 96º спиртом.
- Окраска: после фиксации промывка, затем окраска в ацетоорсеине (9 частей 2% орсеина + 1 часть 1N НСІ) в течение нескольких минут со слабым подогревом. Затем объект переносится на предметное стекло в каплю 1% ацетоорсеина и раздавливается (если материал хранится в 70º спирте, то перед окраской он помещается на 1 час в 45% уксусную кислоту).
Приготовление ацетоорсеина: 2 г. орсеина на 100 см3 ледяной кислоты. Слегка прокипятить, остудить и профильтровать. Для получения 1% ацетоорсеина добавить равное количество дистиллированной воды.
Начало статьи читайте: Постоянные микроскопические препараты. Фиксаторы. Часть 1
Авторы статьи: Ляпустина Е.В., Сатарова Т.Н.
Автор фото (микротомный срез фиксированной зерновки кукурузы — постоянный препарат ) в статье: Ляпустина Е.В.