Технологически метод искусственного опыления или опыления in vitro предусматривает обязательную кастрацию самоопыляющихся растений за несколько дней до распускания бутонов с последующей изоляцией пергаментными или марлевыми изоляторами. За день до раскрытия бутонов их срезают, несколько секунд выдерживают в 70% этиловом спирте и стерилизуют в течение 10 минут хлорной водой. Затем из бутонов офтальмологическими пинцетами изымают или целый пестик (с рыльцем, столбиком и завязью), или завязь, стенку которой разрезают, чтобы обнажить семенные зачатки. Иногда вырезают кусочки плаценты с семенными зачатками [Мельничук, 2003].
Изолированные таким образом составляющие цветка переносят на питательную среду, а через 2-3 суток к ним «подсевают» предварительно простерилизованную пыльцу того растения, которым хотят оплодотворить семенной зачаток. Пыльцу стерилизуют или ультрафиолетовыми лучами около 30 мин., или ее собирают в стерильные бюксы с еще не раскрытых бутонов, которые перед этим поверхностно стерилизуют. Высеянная пыльца прорастает на агаризованной среде, пыльцевые трубки через микропиле семенного зачатка попадают в зародышевый мешок и оплодотворяют яйцеклетку. Оплодотворенный семенной зачаток увеличивается в размерах. Развитие зародыша в условиях in vitro происходит нормально, через несколько дней образуется семя, тут же, в пробирке, минуя стадию покоя, прорастает и формирует растения, которые высаживают в горшки с почвой для адаптации, а затем переносят в теплицу [Мельничук, 2003]. Полученные растения нормально развиваются и формируют цветки, дающие мужские споры (микроспоры, которые преобразовываютя в пыльники) и женские (мегаспоры, образующие завязи).
Автор статьи и фото в статье: Ляпустина Е.В.