Каллус

Опубликовано: 05 марта 2016 | Статьи по биотехнологии

Каллусные культуры. Каллус кукурузы

Метод культивирования изолированных клеток и тканей на искусственных питательных средах в стерильных условиях (in vitro) получил название культуры изолированных тканей и приобрел особое значение в связи с возможностью использования его в биотехнологии. Одним из принципов разработки метода культуры тканей является степень воспроизводства in vitro условий близких или идентичных тем, в которых клетки находятся на материнском растении. Это одна из причин различной возможности выращивания in vitro растительных клеток, тканей и органов. Еще одним условием успешного культивирования изолированных культур, в том числе кукурузы, является стерильность питательной среды, посуды, материалов, инструментов, посадочного материала [4, 18, 36]. Сейчас накоплено большое количество данных, свидетельствующих о том, что способность к образованию каллуса, темп и тип роста изолированных клеток, их способность к разным типам морфогенеза зависит не только от состава питательной среды, условий выращивания и возраста растений-доноров, но и от физиологического состояния этих растений, сезона, стадии развития исходного органа, тканевой принадлежности експлантанта, его размера и ориентации на питательной среде, некоторых специфических особенностей [18, 35]. В случае, если природные условия in vitro воспроизводятся более полно для того или иного типа клеток, тканей, то они выращиваются успешнее. Однако нативные условия in vitro во всех случаях достигаются и воспроизводятся не полностью, поэтому клетка оказывается в несколько иных физико-химических условиях, что приводит к временным и качественным изменениям в реализации генетической информации. На этой основе методом культуры тканей решаются различные фундаментальные и прикладные вопросы. Культура изолированных тканей обычно представлена каллусными тканями — каллусами. Каллусна ткань — это неорганизованная пролиферирующая ткань, состоящая из дедиференциированных клеток.

Способность ряда каллусных культур к органогенезу обуславливает их использование для получения новых форм растений. Каллусные культуры используется в исследованиях по морфогенезу и при получении культур для синтеза вторичных метаболитов. Стадия каллуса обычно входит в процесс получения культур различных типов [3, 18, 56, 57]. В ответ на ранение паренхимные клетки дифференцируются, переходят к делению и образуют недифференцированную ткань, получившая название каллус. Образование и рост каллуса регулируется двумя фитогормонами: ауксины и цитокинины [18, 35, 56, 57]. С помощью этих веществ образование каллуса можно индуцировать и в тех тканях растений, которые его не образуют в ответ на ранение. Ауксины вызывают процесс дедиференцирования клеток, готовит их к делению, а цитокинины — пролиферацию дедиференцированных клеток. В качестве источников ауксинов в питательных средах используют 2,4-дихлорфеноксиоцтову кислоту (2,4-Д), индолил-3-уксусную кислоту (ИУК), α-нафтилуксусную кислоту (НУК), а в качестве источников цитокининов — кинетин, 6 — бензиламинопурин (6-БАП), зеатин [18, 35, 36, 56, 57]. ИУК обладает меньшей активностью, поскольку разрушается ИУК-оксидазы первичного эксплантата. При индукции образования каллуса вещества ауксиновой природы следует применять в 10 раз более высокой концентрации, чем та, которая используется для поддержания его роста. Однако исключение составляет каллус эндосперма кукурузы, растущий на средах без ауксинов, так как обладает способностью их синтезировать [18, 36]. Цитокинины вносят в концентрации 10-7 — 10-5М, при этом кинетин менее активен чем зеанин и 6-БАП [18, 56, 57]. Иногда необходимо внесение более сложных компонентов, например, кокосового молока (5-20%), гидролизата казеина (200-800 мг / л) или дрожжевого экстракта (50-100 мг / л), жидкого эндосперма каштана [17, 18, 56, 57]. Основной особенностью питательных сред для индукции образования каллуса у злаков и их культивирования является высокий уровень содержания регуляторов роста ауксинового типа, чаще всего 2,4-Д и ИУК. ИУК обычно требуется в более высоких концентрациях, чем синтетические регуляторы роста. Оптимальная концентрация ИУК для злаковых достигает 100 мг / л. Доказано, что кинетин, зеатин, инозит и кокосовое молоко не проявляют значительного стимулирующего действия на каллусообразование у кукурузы [36]. При добавлении в среду дрожжевого экстракта, наоборот, стимулируется рост каллуса культуры ткани кукурузы, а солодовый экстракт и миоинозит не увеличивали его рост [36]. Внесение в питательную среду аминокислот в концентрации 0,3; 1,0; 3,0 ммоль / л не имело эффекта или было даже ингибирующим [36]. Существуют сведения об увеличении и улучшении регенерации растений из каллусных культур кукурузы с помощью нитрата серебра [36, 83].

После индукции образования каллуса в асептических условиях каллус отделяют и помещают на поверхность агаризованной питательной среды. В результате этого получают стерильную культуру каллусной ткани. Каллусную ткань можно поддерживать в культуре неограниченно длительное время, периодически разделяя ее на фрагменты и пересаживая на новую питательную среду. Каллусную культуру целесообразно сохранять, используя метод криосохранения [3, 57]. Большинство каллусных тканей не требуют света, так как не имеют хлоропластов и питаются гетеротрофно [56, 57]. Аспекты использования каллусных культур тканей очень разнообразны. В настоящее время каллусные культуры индуцируются практически из любого органа и ткани растения. Однако легкость этого процесса зависит от вида растения и ткани. Для получения каллуса чаще используют среды Уайта, Мурасига и Скуга, Гамборга В5, дополненные 2%-ой сахарозой или глюкозой, смесью витаминов и регуляторами роста [18, 19, 35, 56, 57] и среды Штрауса, Шенка-Хильдебрандта, Линсмайера — Скуга [36]. При получении первичного каллуса эксплантаты тканей рекомендуется культивировать одновременно на нескольких средах с различным соотношением регуляторов роста.

Каллусную ткань можно получить также из одиночных клеток или их агрегатов с суспензионной культуры. Образования каллуса происходит в области первичных или вторичных меристем, а также из паренхимы, прилегающей к этим меристемам или ко вторичным сосудистым тканям. Образования каллуса зависит от размеров эксплантата и клеток, его составляющих. Чем крупнее эксплантаты, тем более сложный и разнообразный набор клеток. В результате этого возникают более сложные отношения между основной тканью фрагмента и клетками, дающими начало роста каллусу. Первичный эксплантаты обычно имеет размер 5-10 мм3 и вес — 20 — 100 мг. Многие ткани обладают физиологической полярностью. Очевидно, в этой связи каллус образуется интенсивнее на стороне эксплантанта, которая на материнском растении обращена к корню. B процессе пересадки (пассивирования) ткани каллус переносят из колбы или пробирки в стерильную чашку Петри. После асептического отделения старых некротизированных участков и кусочков агаризованной среды, каллус разделяют на равные кусочки, которые переносят в колбы или пробирки со средой. Интенсивность роста отдельных каллусов одного и того же варианта может значительно варьировать. Эта вариабельность зависит от того, что инокулюм берут из разных участков первоначального каллуса и из разных каллусов. Поэтому отдельные варианты опытов с каллуснимы культурами должны иметь не менее шести повторностей. Следует подчеркнуть, что опыты по получению каллусных тканей из узкоспециализированных органов и тканей показали, что клетки способны образовывать каллус лишь на определенной стадии развития. На процессы каллусообразования также существенно влияет видовая принадлежность растения, хотя различий в способности к калусообразованию в различных подвидов кукурузы не наблюдается [28].

Каллусная ткань аморфна и не имеет конкретной анатомической структуры, но в зависимости от происхождения и условий выращивания она может быть разной консистенции: рыхлой — состоит из сильно обводненных клеток, легко распадается на отдельные мелкие агрегаты; средней плотности, с четко выраженными меристематическими зонами; плотной, в которой дифференцируются элементы камбия и проводящей системы [18, 56, 57]. Консистенция каллуса зависит в значительной степени от состава среды. Анатомическая структура рыхлых каллусов характеризуется множеством организованных центров меристематической активности, разделенных большими недифференцированными клетками. Существует разница между этими типами каллусов в упаковке клеток: плотные каллусы состоят из тесно упакованных клеток. Обнаруженные различия в химическом составе: у плотных каллусов общее количество полисахаридов клеточной стенки выше, но снижен процент целлюлозы по сравнению с пектиновыми веществами и гемицеллюлозами. Каллусные культуры также различаются по морфологии и степени гетерогенности клеточной популяции, по морфогенетическим и биосинтетическим потенциалам [18, 35].

Каллусные клетки in vitro сохраняют многие физиолого-биохимические особенности, присущие нормальным клеткам, входящие в состав растительного организма. Каллусные клетки сохраняют способность к синтезу вторичных метаболитов, устойчивость к высоким, низким температурам и осмотически активным веществам, к засолонению. Каллусным тканям присуща также фотопериодическая реакция, что связано с сохранением активности фитохрома. Вместе с этим каллусные клетки обладают отдельными свойствами, отличающими их от нормальных клеток. У них появляются специфические белки и уменьшается количество белков, которые характерны для фотосинтезирующих клеток листа, либо вообще исчезают. Каллус и каллусные клетки отличаются значительной генетической гетерогенностью и физиологической асинхронностью [56, 57]. Генетическое разнообразие каллусных клеток позволяет использовать их для клеточной селекции на устойчивость к неблагоприятным факторам среды, фитопатогенам и на повышенную производительность.

Список литературы

  1. Батыгина Т.Б. Хлебное зерно: Атлас. – Л.: Наука. Ленинград. отд., 1987. – 103 с.
  2. Батыгина Т.Б. Graminad-тип эмбриогенеза. – В кн. Эмбриология цветковых растений. Терминология и концепции. Т.2. – СПб.: Мир и семья-95, 1997. – С.520 – 526.
  3. Биотехнология сельскохозяйственных растений / с предисл. Бутенко Р.Г. – М.: Агропромиздат, 1987. – 301 с.
  4. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. – М.: Наука, 1964. – 270 с.
  5. Гаркава О.М. Оцінка та добір селекційного матеріалу кукурудзи на жаро- та посухостійкість: Автореф.дис… канд.с.-г. наук: 06.01.05 / Інститут зернового господарства. – Дніпропетровськ, 2006. – 20с.
  6. Генетика сільськогосподарських рослин / За ред. Макрушина М.М.. – К.: Урожай. – 1996. – 225с.
  7. Гиренко А.П., Ливенский А.И. Посевы кукурузы с однолетними бобовыми культурами на зеленый корм и силос / Селекция и физиология, технология и механизация возделывания кукурузы и других полевых культур (Сборник научных статей). – Днепропетровск: ВНИИ кукурузы. – 1972. – 334 с.
  8. ГОСТ 12.1.005 – 76. Метеорологічні умови.
  9. ГОСТ 12.4 131-83 халат жіночий, артикул 3161 кольору білого або бежевого.
  10. ГОСТ 12.4 132-83 халат чоловічий, артикул 3161 кольору білого або бежевого.
  11. ГОСТ 12.1.005–88. ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны.
  12. Грабовський М.Б. Адаптація вихідного матеріалу кукурудзи плазми Лакауне до умов степової зони України: Автореф.дис… канд.с.-г. наук: 06.01.05 / Інститут зернового господарства. – Дніпропетровськ, 2006. – 17с.
  13. Дерев’янський В. Технологія ущільненого вирощування сої з кукурудзою на силос // Пропозиція. – 2004. – №8 – 9. – С.54-56.
  14. ДНАОП 0.00–8.05–94. Єдина державна система показників обліку умов та безпеки праці.
  15. ДНАОП 1.1.10–1.01–97. Правила безпечної експлуатації електроустановок.
  16. Домашнев П.П., Дзюбецкий Б.В.,КостюченкоВ.И. Селекция кукурузы. – М.: Агропромиздат, 1992. – 208 с.
  17. Евтушенко А.Н., Фомичев Ю.К. Введение в биотехнологию. – Мн.: БГУ, 2002. – 105 с.
  18. Калинин Ф.Л., Сарнацкая В.В., Полищук В.Е. Методы культуры тканей в физиологии и биохимии растений. – Киев: Наукова думка, 1980. – 488 с.
  19. Калинин Ф.Л., Кушнир Г.П., Сарнацкая В.В. Технология микроклонмльного размножения растений. – К.: Наукова думка, 1992. – 232с.
  20. Каминский С.Л., Смирнов К.М., Жуков В.Ч., Краснощеков Н.А. Средства индивидуальной защиты. Справ. изд. – Л.: Химия, 1989. – 400с.
  21. Кордін О.І. Технологічні заходи вирощування холодостійких гібридів кукурудзи різних груп стиглості: Автореф.дис… канд.с.-г. наук: 06.01.09 / Інститут зернового господарства. – Дніпропетровськ, 2006. – 18с.
  22. Круглова Н.Н., Горбунова В.Ю. Физиологические основы андрогенеза invitroу злаков // Тез.докл. 3-го съезда ВОФР.Ч.1. Санкт-Петербург. – 1993. – С.86.
  23. Круглова Н.Н., Горбунова В.Ю. Физиологические аспекты андрогенеза invitroу злаков // Тез.докл. 3-го Российск. симп. “Новые методы биотехнологии растений”. Пущино. – 1995. – С.18.
  24. Круглова Н.Н., Горбунова В.Ю., Куксо П.А. Морфогенез в культуре изолированных пыльников: роль фитогормонов // – 24 c.
  25. Лавриненко Ю.О. Еколого-генетична мінливість кількісних ознак зернових культур та її значення для селекції в умовах зрошення: Автореф.дис… канд.с.-г. наук: 06.01.05 / Інститут зернового господарства. – Дніпропетровськ, 2006. – 36с.
  26. Лакин Г.Ф. Биометрия. Учеб. пособие для биолог. спец. вузов. – 4-е изд., перераб. и доп. – М.: Высшая школа, 1990. – 352 с.
  27. Макаров Г.В., Васин А.Я. и др. Охрана труда в химической промышленности. – М.: Химия, 1989. –596 с.
  28. Мельничук М.Д., Новак Т.В., Кунах В.А. Біотехнологія рослин: Підручник – К.: ПоліграфКонсалтинг, 2003. – 520с.
  29. Методические рекомендации к выполнению раздела “Охрана труда” /Освещение/в дипломных проектах и работах для студентов V –VI курсовтехнологических специальностей всех форм обучения / Сост.: Ванжа Н.И., Кулик А.П. и др. –Днепропетровск: ДХТИ, 1989. –28 с.
  30. Методические указания к выполнению организационно-экономической части дипломной работы для студентов-исследователей   курса всех спеціальностей / Сост. С.А. Воєводин, В.Ф. Прудников. – Днепропетровск: ДХТИ, 1990. – 16 с.
  31. Методичні рекомендації до виконання розділу “Охорона праці” /засоби та способи гасіння пожеж/ у дипломних проектах та роботах для студентів V– VIкурсів технологічних спеціальностей усіх форм навчання / Укл.: Ванжа М.І., Яковлєв В.І. та ін. – Дніпропетровськ: ДХТІ, 1993. – 28 с.
  32. Методичні рекомендації до виконання розділу “Охорона праці” /електробезпека/ у дипломних проектах та роботах для студентів V– VIкурсів технологічних спеціальностей усіх форм навчання / Укл.: Герасименко В.О., Науменко Г.П. та ін. – Дніпропетровськ: ДХТІ, 1993. – 20 с.
  33. Методичні рекомендації до виконання розділу “Охорона праці” /промислова вентиляція/ у дипломних проектах та роботах для студентів V– VIкурсів технологічних спеціальностей усіх форм навчання / Укл.: Яковлєв В.І., Кулік О.П. та ін. – Дніпропетровськ: УДХТУ, 2001. – 33 с.
  34. Москалева О.В., Каравайко Н.Н. Динамика эндогенных фитогормонов в развивающихся проростках кукурузы // Физиология растений, 1990. – Т.37. – Вып.6. – С.1113 – 1121.
  35. Мусієнко М.М. Фізіологія рослин: Підручник. – К.: Либідь, 2005. –808 с.
  36. Мусияка В.К. Культура тканей кукурузы // Физиология и биохимия культурных растений. – 1997. – Т.29. – №4. – С.243 – 257.
  37. НАПБ Б.07.005–86. Определение категорий помещений и зданий по взрывоопасной и пожарной опасности.
  38. Основи економічної теорії:конспект лекцій / За ред. к.е.н., доц. Н.С. Горбач. – Дніпропетровськ: ЦЕО, 2001. – 168с.
  39. Перспективність використання ранньостиглих гібридів кукурудзи // Пропозиція. – 2005 – №1. – С.54 – 55.
  40. Пінчук Н.І., Солоний П.В. Ефективні протруйники насіння кукурудзи // Агроном. – 2006. – №1. – С.96 – 97.
  41. Сатарова Т.Н. Некоторые генотипические и онтогенетические особенности реакции кукурузы в культуре пыльников // Цитология и генетика. – 1997. – Т.31, №3. – С.60 – 65.
  42. Сатарова Т.Н. Культивирование пыльников кукурузы на жидкой питательной среде // Вісник Дніпропетровського університету. Сер. Біологія. Екологія. – 1999. – Вип.6. – С.135 – 143.
  43. Сатарова Т.Н. Использование культуры пыльников для получение гаплоидов у кукурузы // Кукуруза и сорго. – 2001. – №4. – С.21 – 23.
  44. Сатарова Т.М. Андрогенез та ембріокультура у кукурудзи invitro.Дис… доктора біол. наук. – Дніпропетровськ, 2002. – 537 с.
  45. Сатарова Т.Н. Искусственное оплодотворение у кукурузы и перспективы его использования // Вісник Дніпропетровського університету. Сер. Біологія. Екологія. – 2006. – №4. – С.172 – 176.
  46. СНиП II–4–79. Естественное и искусственное освещение.
  47. СНиП 2.04.05–91. Отопление, вентиляція и кондиционирование.
  48. Соколов Б.П.История и методы селекции // Основы селекции и семеноводства гибридной кукурузы. – М.: Колос. – 1968. – С.7– 58.
  49. Соколов Б.П., Дзюбецкий Б.В. Основные вопросы селекции кукурузы в условиях орошения / Селекция и физиология, технология и механизация возделывания кукурузы и других полевых культур (Сборник научных статей). – Днепропетровск: ВНИИ кукурузы. – 1972. – 334 с.
  50. Стрельчук С.І., Демидов С.В., Бердишев Г.Д., Голда Д.М. Генетика з основами селекції. – Київ: Фітосоціоцентр, 2000. – 292с.
  51. Суханов В.М., Клочков В.П., Хохлов С.С., Тырнов В.С. Использование культуры пыльников для получения гаплоидов / Труды II Всесоюзной конференции культура клеток и тканей. – К.: Наукова думка. – 1978.– С.312 – 314.
  52. Турін Є.М., Полянський Б.А. Беззмінна сівба кукурудзи на зерно та силос // Вісник аграрної науки. – 2005. – №5. – С.75 – 77.
  53. Филиппов Г.Л. Эколого-физиологические обоснование повышения засухоустойчивости и продуктивности кукурузы / Автореф.дис… докт.биол.наук… – Киев, 1984.
  54. Хаджинов М.И., Рядчиков В.Г., Захарова Н.В. Метантная кукуруза с пониженным содержанием лигнина // Вестник с.-х. науки. – 1978, №1.
  55. Циков В.С. Технология, гибриды, семена. – Днепропетровск: Институт кукурузы, 1995. – 68 с.
  56. Шевелуха В.С., Калашникова Е.А., Дегтярев С.В., Кочиева Е.З., Прокофьев М.И. и др. Сельскохозяйственная биотехнология. – М.: Высшая школа, 1998. – 416с.
  57. Шевелуха В.С., Калашникова Е.А., Воронин Е.С. и др. Сельскохозяйственная биотехнология. – М.: Высшая школа, 2003. – 469с.
  58. Эзау К. Анатомия семенных растений. Книга 2. – М.: Мир, 1980. – 560с.
  59. Abbe E.C., Stein O.L. Growth of the shoot apex in maize embryogeny // Amer.J.Bot. – 1954. – V.41. – N 4. – P.285 – 293.
  60. Campenot M.K., Zhang G., Cutler A.J., Cass D.D. Zea mays embryo sacs in culture .1. Рlant regeneration from 1 day after pollinаtion embryos // Amer. Journal of Botany. – 1992. – N.12. – P.1368 – 1373.
  61. Chabond A., Perez R. Generative cells and male gametes: isolation, physiology and biochemistry // Int. Rev. Cytol. – 1992. – Vol.140. – P.205 – 232.
  62. Chaudhury A., Koltunow A., Payne T. etal. Control of early seed development // Ann. Rev. Cell. Dev. Biol. – 2001. – Vol.17. – P.677 – 699.
  63. Faure E., Mogensen C., Kranz E., Digonnet C., Dumas C. Ultrasrtructural characterization and three-dimensional reconstruction of isolated maize (Zea mays L.) egg cell protoplasts // Protoplasma. – 1992. – V.171. – P.97 – 103.
  64. Faure J.E., Digonnet C., Mol H., Matthys-Rochon E., Dumas C. In vitro pollination and fertilisation in maize (Zea mays L.): technical procedures and prospects for the dissection of the double fertilisation process // Plant Sci. – 1994. – V.104. – P.1 – 10.
  65. Fong F., Smith J.D., Koehler D.E. Earlyeventsinmaizeseeddevelopment // PlantPhysiol. – 1983. – V.73. – N4. – P.899 – 901.
  66. Genovesi A.D., Collins G.B. In vitro production of haploid plants of corn via anther culture // Crop Sci. – 1982. – V.22. – N 6. – P.1137 – 1144.
  67. Guo F., Huang B.Q., Han Y., Zee S. Y. Fertilization in maize indeterminate gametophyte l mutant // Protoplasma. – 2004. – Vol.223. – P.111 – 120.
  68. Kranz E., Bautor J., Lörz H. In vitro fertilization of single isolated gametes of maize mediated by electrofusion // Sex. Plant Reprod. – 1991. – Vol.4. – P.12 – 16.
  69. Kranz E., Bautor J., Lörz H. In vitro fertilization with isolated, single gametes results in zygotic embryogenesis and fertile maize plants // Plant Cell. – 1993. – Vol.5. – P.739 – 746.
  70. Kranz E., Wiegen P., Lörz H. Early cytological events after induction of cell division in egg cells and zygote development following in vitro fertilization with angiosperm gametes // Plant J. – 1995. – Vol.9. – P.9 – 23.
  71. Kranz E., Wiegen P., Quarder H., Lörz H. Endosperm development after fusion of isolated, single maize sperm and central cells in vitro // Plant Cell. – 1998. – Vol.10. – P.511 – 542.
  72. Leduc N., Matthys-Rochon E., Rougier M. et al. Isolated maize zygotes mimic in vivo embryonic development and express microinjected genes when cultured in vitro // Dev. Biol. – 1996. – Vol.177. – P.190 – 203.
  73. Matthys-Rochon E., Digonnet C., Dumas C. Characterizations of Zea mays embryo sac using fluorescent probes and microinjection of Lucifer yellow into the female cells //Biotechnology applications of microinjection, microscopic imaging and fluorescence. – NY.: Plenum Press, 1992. – P.53 – 60.
  74. Matthys-Rochon E., Mol R., Heizmann P., Dumas C. Isolation and microinjection of active sperm nuclei into egg cells and central cells of isolated maize embryo sacs // Zygote. – 1994. – V.2 – P.29 – 35.
  75. MengF., NiZ., Wu L., SunQ. Differential gene expression between cross-fertilized and self-fertilized kernels during theearlystagesof seed developmentinmaize// PlantScience(Oxford). – 2005. – Vol.168. – P.23 – 28.
  76. Mol R., Matthys-Rochon R. E., Dumas C. Embryogenesis and plant regeneration from maize zygotes by in vitro culture of fertilized embryo sacs // Plant Cell Rep. – 1995. – Vol.14. – P.743 – 747.
  77. Okamoto T., Higuchi K., Shinkawa T. et al. Identification of major proteins in maize egg cells // Plant and Cell Physiology. – 2004. – Vol.45. – P.1406 – 1412.
  78. Okamoto T., Scholten S., Loerz H., Kranz E. Identification of genes that are up- or down-regulated in the apical or basal cell of maize two-celled embryos and monitoring their expression during zygote development by a cell manipulation and PCR-based approach // Plant and Cell Physiology. – 2005. – Vol.46. – P.332 – 338.
  79. Roeckel P., Dupuis I., Detchepare S., Matthys-Rochon E., Dumas C. Isolation and viability of sperm cells from corn (Zea mays) and rape (Brassica oleracea) pollen grains. – In: «Plants Sperm Cells as Tools for Biotechnology». – Pudoc, Wageningen, 1988. – P.105 – 110.
  80. Roeckel P., Dumas C. Survival at 20оC and cryopreservation of isolated sperm cells from Zea mays pollen grains //Sex. Plant Rep. – 1993. – V.6. –P.212 –216.
  81. Saze H., Scheid O. M., Paszkowski J. Maintenance of CpG methylation is essential for epigenetic inheritance during plant gametogenesis //Nature Genetics. – 2003. – Vol.34. – P.65 – 69.
  82. Scholten S., Kranz E. In vitro fertilization and expression of transgene in gametes and zygotes // Sex. Plant Reprod. – 2001. – Vol.14. – P.35 – 40.
  83. SongstadD.D., ArmstrongC.L., PetersenW.L. AgNO3 increases type II callus production from immature embryos of maize inbred B73 and its derivatives // PlantCellRep. – 1991. – V.9. – P.699 – 702.
  84. Ting Y.C., Yu M., Zheng W.Z. Improved anther culture of maize (Zea mays) // Plant Sci. Lett. – 1981. – V.23. – P.139 – 145.
  85. Van Lammeren A.M. Development morphology and cytology of the young maize embryo (Zea mays L.) // Acta Bot. Neerl. – 1986. – V.35. – P.169 – 188.
  86. ZhangG., GiffordD., CassD.RNA and protein synthesis in sperm cells isolated from Zea mays L. pollen // Sex. PlantReprod. – 1993. – Vol.6. – P.239 – 243.

Автор статьи: Ляпустина Е.В.

Автор фото в статье: Сатарова Т.Н.

 

Метки: , ,