Поиск носителей липолитических ферментов для гидролиза масел
Иммобилизация на полимерных или минеральных носителях липолитических ферментов, способных гидролизовать растительные масла, с целью получения стабильных препаратов липазы, продления срока их хранения и проведения гидролиза масла в различных биотехнологических процессах (получение глицерина и жирных кислот, каталитическое получение новых жиров медицинского назначения, расщепление технических кормовых жиров, при получении гидролизатов масла, при очистке масляных стоков и при переэтерификации глицеридов, для химико-фармацевтических продуктов) продолжает вызывать интерес у исследователей и остается актуальной для биотехнологов для решения технологических и аналитических задач.
Ряд кропотливых исследований по иммобилизации липаз, проведенных узбекскими, латвийскими или российскими исследователями, указывает на особенность липаз. На возможность потери активности, стабильности, рН-оптимума, а также потери субстратной специфичности. Субстратная специфичность липолитических ферментов проявляется в зависимости от типа три-ди-или моноглицериды, позиционное расщепления 1,3 — или 2 — глицеридного связи, а также длины, насыщенности и характера кислотного остатка. Кроме этих основных факторов, влияющих на иммобилизованный липолиз, субстратная специфичность проявляется в зависимости от физического состояния субстрата — мицелла, эмульсия, гидрофобная капля или раствор.
Носителями для иммобилизации биологически активных веществ используют различные материалы: природные и синтетические, неорганические (синтетические кремнеземные сорбенты, металлы алюминия и магния и их окислы, нержавеющая сталь, глины, керамика, природные минералы) и органические, пористые и непористые (особенно для высокомолекулярных структур), в форме порошков, шариков, частиц неправильной формы и монолитов (для снижения диффузного давления при высоких скоростях потока жидкости или газа).
Неорганические носители с развитой поверхностью механически и химически стойкие стали перспективной матрицей для иммобилизации ферментов. Адсорбция — самый простой метод получения модифицированных носителей. Для предоставления носителя фермента, особенно липазы, гидрофобных свойств сорбент модифицируют различными реагентами. Активным модификатором неорганических носителей является кремнийорганические покрытия неорганического материала силанизуючимы агентами (АПТЕС).
Нами рассматривается возможность использования отечественных липолитических ферментов липолактин и соли зим (ГП «Энзим» г. Ладыжин) для гидролиза масел путем иммобилизации желательно на отечественных носителях. Иммобилизация ферментов могу быть осуществлена методом адсорбции на активированных минеральных носителях, методом ковалентного сшивания с высокомолекулярными соединениями, с использованием гидрогелей подобное.
Важным методом иммобилизации липаз является адсорбция фермента на немодифицированных минеральных носителях, в первую очередь на кремнеземе, очень эффективных при хроматографии вакцин и вирусных суспензий. Возможными носителями для адсорбции липаз могут силикагель (СГ, СХ, МС), целлюлоза (АЕЦ, МКЦ), оксид алюминия (Аl2O3), каолин, аэросил -50. Особенно интересен непористый высокодисперсный диоксид кремния — аэросил.
Источник: Губрій З.В., Швед О.М., Павлик О.М., Мартинюк Н.Б., Новіков В.П. Пошук носіїв ліполітичних ферментів для гідролізу олій / Биотехнология сборник