Изучение бактериоцинсинтезирующих свойств пробиотических штаммов

Микробная экология генитального тракта связана с внутренней средой организма женщины, с особенностями ее физиологии. Состав вагинальной микрофлоры является показателем женского здоровья, служит одним из факторов естественной резистентности макроорганизма и играет важную роль в поддержании нормального физиологического статуса женщин. Микробиоценоз влагалища здоровых женщин представлен облигатной группой микроорганизмов – лактобактериями, бифидобактериями, коринебактериями и факультативной группой – энтерококками, энтеробактериями, пептококками, гарднереллами, пропионовокислыми бактериями. Среди них у здоровых женщин обнаруживают до 92-97% молочнокислых бактерий (МКБ). Лакто-и бифидобактерии ассимилируют гликоген, вырабатываемая клетками плоского эпителия влагалища, и с помощью анаэробного гликолиза расщепляют его до молочной кислоты, что обуславливает, кислую реакцию (рН = 4,3-4,7) влагалищного содержимого. В норме за счет антимикробного действия кислой среды секрета влагалища обеспечивается высокая степень бактериальной защищенности урогенитального тракта от проникновения патогенных микроорганизмов, вызывающих развитие воспалительных заболеваний репродуктивной системы женщины. Преимущественно антагонистические свойства МКБ обусловленные продукцией молочной кислоты, которая является весомым, но не единственным фактором антагонизма. Кроме молочной, МКБ могут продуцировать другие органические кислоты, лизоцим, перекись водорода, диацетил, вещества белково-пептидной природы – бактериоцины. Исследование бактериоцинсинтезирующих свойств МКБ особенно важно для рационального использования в составе многокомпонентных препаратов-пробиотиков, предназначенных для лечения и профилактики дисбиотических состояний человеческого организма, а также при анализе условий, способствующих возникновению бактериальных инфекций, изучении динамики изменения микрофлоры. К настоящему времени работы по выделению и изучению бактериоцинов лакто-и бифидобактерий практически не ведутся. Поэтому интересным было определить наличие таких веществ в исследуемых нами штаммов МКБ – Lactobacillus plantarum 8А-Р3 и Bifidumbacterium bifidum I. В предыдущих исследованиях нами была доказана высокая антагонистическая активность этих штаммов к таким тест-культур, как Candida albicans, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Proteus vulgaris, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis. Бактериоцинсинтезирующие свойства Lactobacillus plantarum и Bifidumbacterium bifidum исследовали методом перекрестного антагонизма, модифицированным V. Ocanaта с соавт., к тем же тест-культур. Для этого исследуемые штаммы выращивали 14 ч при 370С в мясо-пептонном бульоне (МПБ), после чего центрифугировали 30 мин при 2000 об / мин, отделяли супернатант, нейтрализовали действие молочной кислоты добавлением NаОН до рН = 7,0. Обработанную таким образом надосадочную жидкость автоклавировали при 1210С, 1 атм 20 мин. Тест-культуры выращивали 14 ч при 370С в МПБ, после чего смешивали с расплавленным и охлажденным до 450С мясо-пептонным агаром (МПА) (0,7% агара) и наслаивали на МПА (1,5% агара) в чашке Петри. После застывания в толщу верхнего агара вносили 0,05 мл супернатанта. Подавления роста тест-микроорганизма наблюдали за наличием зоны возле места «укола» через 24-48 ч инкубации при 370С. Штаммы Lactobacillus plantarum и Bifidumbacterium bifidum задерживали рост Pr. vulgaris, St. aureus, B. subtilis. Задержку роста кишечной и синегнойной палочек и дрожжей рода Candida не наблюдали. Задержка роста тест-культур, которые являются основными возбудителями воспалительных заболеваний урогенитального тракта женщины, удостоверяющий наличие у лакто-и бифидобактерий специфических антимикробных соединений. То есть, антимикробная активность МКБ обусловлена как действием органических кислот, так и производством специфических антибиотикоподобных веществ бактериоцинов. С учетом этого, исследуемые штаммы Lactobacillus plantarum и Bifidumbacterium bifidum могут иметь в перспективе практическое значение при конструировании вагинальных пробиотиков для профилактики дисбиозов и комплексном лечении воспалительных заболеваний репродуктивной системы женщин.

Источник: Изучение бактериоцинсинтезирующих свойств пробиотических штаммов / О.С. Калюжная, Л.С. Стрельников, О.П. Стрілець // Біотехнологія. Наука. Освіта. Практика: тези доповідей IV Міжнародної науково-практичної конференції (Дніпропетровськ, 11 – 13 листопада 2008 р.) – Дніпропетровськ, 2008. – С. 26-27.

 

Метки: , , ,